高效液相色譜分析，如何避免堿性化合物的拖尾問題？

更新時間：2021-08-31 點(diǎn)擊次數(shù)：4143

　　提起生物堿，制藥的小伙伴肯定不陌生，它是中草藥中最重要也*有價值的生物活性成分之一。生物堿可分為59種，它們的結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，用傳統(tǒng)的方法分離效果不佳。高效液相色譜法還沒出現(xiàn)之前，對于生物堿的分離純化一直是學(xué)者們的難題。但是，即使使用液相色譜法分離，也會存在許多問題。堿性化合物分析中顯著的難題是峰形拖尾，而且堿性越強(qiáng)的時候，就越容易發(fā)生拖尾現(xiàn)象。

恒譜生和你一起探討一下峰拖尾該如何避免！

　　1、流動相

　　調(diào)節(jié)流動相也可以改善峰拖尾的現(xiàn)象，前期在選擇流動相的時候，要考慮流動相pH值的范圍。對堿性化合物來說，流動相的pH值對峰形會有較大影響，并且對保留因子和選擇性也有很大影響。恒譜生建議如果要分離堿性化合物，最好選擇pH值≤2.5，這樣會有比較好的峰形。恒譜生液相色譜柱的ph穩(wěn)定值在1.5-11不等，適合各種需求、各種分離模式的液相分析。

2、固定相

　　C18色譜柱是反相色譜分析中經(jīng)常使用到的色譜柱。但是十八烷基碳鏈很長，鍵合的時候空間位阻非常大，導(dǎo)致鍵合率不高，這樣，便會殘留大量未被鍵合的硅羥基。硅羥基在一些反相流動相中，容易解離。由于游離的硅羥基與解離后堿性化合產(chǎn)生的二級作用，導(dǎo)致了堿性化合物峰行出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象。因此分析堿性化合物時，選擇硅羥基活性小的鍵合相是獲得良好峰形的關(guān)鍵。對于固定相的選擇最好采用99.99%純度以上的超純硅膠，金屬殘留量較低低，使得鍵合率增加，游離的硅羥基減少。

　　恒譜生液相色譜柱都采用高純度的硅膠基質(zhì)填料，其中USHB C18-BIO專為各種堿性化合物的分離而設(shè)計，pH值的耐受范圍為1.5-10，金屬雜質(zhì)極低，采取二次封尾的技術(shù)。這樣做主要是為了進(jìn)一步降低硅羥基的活性使得分析時可以獲得良好峰形。